技術(shù)文章
Daicel 的 CHIRALPAK® AD-H、CHIRALCEL® OD-H 等多糖涂敷型手性柱,長期使用后易因異丙醇?xì)埩?、樣品吸附?dǎo)致柱效下降(理論板數(shù)降、分離度差)。100% 乙醇因極性適中、不破壞涂敷層,是恢復(fù)柱效的關(guān)鍵手段,以下為針對 CHIRALPAK® AD-H、CHIRALCEL® OD-H 的正確操作。
一、核心前提:僅適用于多糖涂敷型
100% 乙醇沖洗僅適配 CHIRALPAK® AD-H 手性柱、CHIRALCEL® OD-H 手性柱 等多糖涂敷型,禁止用于 CHIRALPAK® AGP(蛋白質(zhì)鍵合型)、CROWNPAK® CR (+)(冠醚型)—— 乙醇會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性、冠醚層脫落,反而損壞柱效。
二、3 步正確操作(以 4.6mm 內(nèi)徑柱為例)
預(yù)處理:清除高危雜質(zhì)
若用正相(烷烴 / 異丙醇):先以 正己烷 / 異丙醇(90:10)0.5ml/min 沖 20 分鐘,去除殘留異丙醇與二乙胺;
若用反相(乙腈 / 水):先以 水 / 乙腈(60:40)0.5ml/min 沖 30 分鐘,除鹽,避免與乙醇析出堵塞柱床。
乙醇沖洗:控速控時
流速:AD-H、OD-H 均用 0.5ml/min(半制備柱按內(nèi)徑換算),柱壓不超 30MPa;
時間:室溫沖 60 分鐘,殘留嚴(yán)重(如 OD-H 分離生物堿后)可延至 90 分鐘,不超 2 小時。
后續(xù)平衡:恢復(fù)分析條件沖完用目標(biāo)流動相平衡:正相分析(如 AD-H 拆芳香族)用 正己烷 / 異丙醇(90:10)0.5ml/min 平衡 30 分鐘,復(fù)測標(biāo)準(zhǔn)品(AD-H 用聯(lián)萘酚、OD-H 用麻黃堿),柱效通常恢復(fù)至初始 85% 以上。
三、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
頻率:每月最多 1-2 次,過度沖洗會加速 AD-H、OD-H 固定相老化;
禁忌:若沖洗后柱效仍無改善,需排查硅膠腐蝕(如強(qiáng)堿性溶劑),而非單純殘留問題。
通過以上操作,可低成本恢復(fù) AD-H、OD-H 手性柱效,延長其在藥物研發(fā)、天然產(chǎn)物分析中的使用壽命。
廣州綠百草作為 Daicel 授權(quán)代理商,提供色譜柱選型、方法開發(fā)等技術(shù)支持,助力客戶高效實(shí)現(xiàn)手性分離與分析。