Daicel CHIRALCEL® OD-RH 作為多糖衍生物涂敷型反相手性柱，憑借硅膠表面涂敷的纖維素 - 三 (3,5 - 二甲基苯基氨基甲酸酯) 固定相，在水溶性手性化合物（如生物堿、藥物中間體）分離中表現(xiàn)突出。

反相模式下，pH 與溫度是影響其手性選擇性、峰形及柱效的核心因素，合理調(diào)節(jié)可大幅提升分離效果，同時需結(jié)合同類鍵合型反相手性柱（如 Daicel CHIRALPAK IG 手性柱（87325））的特性差異優(yōu)化方案。

一、pH 調(diào)節(jié)：適配化合物極性，優(yōu)化峰形與選擇性

Daicel CHIRALCEL OD-RH 手性柱的 pH 適用范圍為 2.0~9.0，不同 pH 條件通過改變固定相電荷狀態(tài)與樣品解離度，影響手性空腔與對映體的相互作用：

· 酸性 / 兩性化合物（如含羧基的手性藥物）：

推薦 pH 2.0~3.0，選用 50mM 磷酸鹽緩沖液（磷酸調(diào)節(jié)）或 0.1% 甲酸水溶液，抑制樣品解離，增強(qiáng)與固定相的氫鍵作用。例如拆分布洛芬對映體時，pH 2.5 條件下分離度（Rs）可達(dá) 2.8，峰形對稱因子接近 1.0。

· 堿性化合物（如麻黃堿、偽麻黃堿）：

適配 pH 8.0~9.0，用 20mM 碳酸氫銨緩沖液（二乙胺調(diào)節(jié) pH），減少固定相殘留硅羥基對堿性樣品的吸附，避免峰形拖尾。

需注意：pH>7.0 時柱溫必須控制在 5~25℃，防止高溫加速硅膠基質(zhì)溶解，這一點與鍵合型的 CHIRALPAK IG 手性柱（87325）類似 ——CHIRALPAK IG 手性柱（87325）雖為鍵合型，pH>7 時也需低溫保護(hù)，但耐堿性略優(yōu)于涂敷型的 Daicel CHIRALCEL OD-RH。

· 中性化合物（如酯類、酰胺類）：

無需嚴(yán)格調(diào)節(jié) pH，直接用純水 / 乙腈（60:40 v/v）即可，依賴固定相的空間位阻效應(yīng)實現(xiàn)拆分。

禁忌：禁止使用 pH>9.0 的強(qiáng)堿性流動相（如高濃度氫氧化鈉溶液），會破壞 CHIRALCEL OD-RH 的涂敷型固定相；也避免 pH<2.0 的強(qiáng)酸性條件，長期使用會導(dǎo)致固定相脫落。

二、溫度調(diào)節(jié)：平衡分離度與分析效率

CHIRALCEL OD-RH 手性柱的柱溫范圍為 0~40℃，溫度通過影響分子運動速率與手性識別作用，調(diào)節(jié)保留時間與分離度，需結(jié)合樣品特性選擇：

· 難拆分對映體（如結(jié)構(gòu)高度相似的手性胺）：

降低柱溫至 0~10℃，減緩分子傳質(zhì)速率，增強(qiáng)固定相螺旋空腔與對映體的空間匹配差異。例如拆分麻黃堿對映體時，0℃ 比 25℃ 分離度提升 35%，但保留時間延長約 1.5 倍。

· 高保留樣品（如疏水性較強(qiáng)的手性酯）：

升溫至 30~40℃，加快樣品洗脫，縮短分析時間（如從 25min 壓縮至 12min），同時避免峰形展寬。此條件下，CHIRALCEL OD-RH 需搭配保護(hù)柱，防止高溫加速固定相老化 —— 這與 CHIRALPAK IG 手性柱（87325）不同，CHIRALPAK IG 手性柱（87325）為鍵合型，高溫下固定相更穩(wěn)定，可在 40℃ 長期使用。

· 常規(guī)分析：

25℃ 為最佳平衡溫度，兼顧分離度（Rs≥2.0）與分析效率（單樣分析時間 <20min），適配藥物研發(fā)中批量樣品的手性純度檢測。

三、與 IG 手性柱（87325）的調(diào)節(jié)邏輯差異

雖同屬反相手性柱，Daicel CHIRALCEL OD-RH（涂敷型）與 Daicel CHIRALPAK IG 手性柱（87325，鍵合型）的調(diào)節(jié)需注意核心差異：

· pH 耐受：CHIRALPAK IG 手性柱（87325）可在 pH 2.0~9.0 全范圍常溫使用，CHIRALCEL OD-RH 僅在 pH 2.0~7.0 可常溫操作；

· 溫度上限：CHIRALPAK IG 手性柱（87325）40℃ 下性能穩(wěn)定，CHIRALCEL OD-RH 長期高溫（>30℃）易導(dǎo)致涂敷層脫落。

實際開發(fā)中，可先以 CHIRALCEL OD-RH（25℃、pH 5.0）初篩，若分離度不足，嘗試低溫 + pH 微調(diào)；若需長期高溫或高 pH 分析，換用 CHIRALPAK  IG 手性柱（87325）優(yōu)化。

通過精準(zhǔn)調(diào)控 pH 適配化合物極性、溫度平衡分離效率，可充分發(fā)揮 CHIRALCEL OD-RH 手性柱的反相分離優(yōu)勢，結(jié)合與 CHIRALPAK IG 手性柱（87325）的特性差異，為水溶性手性化合物（如藥物 API、天然產(chǎn)物）的分離提供高效解決方案。